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胞核-胞浆-胞膜制备试剂盒 oP1201
描述：Nucl-Cyto-Mem Preparation Kit从哺乳动物新鲜或冻存的组织块、贴壁或悬浮培养细胞中，制备细胞核、细胞膜与胞内质膜、细胞浆等三种主要亚细胞组分。独特的试剂成分与优化的制备方案相结合，使胞核-胞膜-胞浆制备简单易行。无需特殊设备和超速离心，只需要玻璃匀浆器和微型高速离心机，在1小时内完成。
制备的细胞核、细胞浆组分纯度甚高，而且较少交叉污染。单一的细胞膜的纯化是一个特殊问题，本试剂盒制备的胞膜是细胞膜和细胞器如线粒体、内质网、高尔基体及其质膜的混合物。制备的细胞核是完整的未裂解的细胞核，但胞浆组分为可溶性胞浆蛋白。制备的亚细胞组分的纯度可胜任后续免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot、酶活性测定、受体分析等。
组成：
(100 extractions, 8 x 106 ~ 1 x 107 cells per extraction)
CER, Cytosol Extraction Reagent，50 ml
MER, Membrane Extraction Reagent，5 ml
NER, Nuclear Extraction Reagent，100 ml
Suspension Buffer，20 ml
储存：4 oC避光保存1年。
说明：
1. 制备的亚组分可直接进行蛋白含量测定、酶活性测定、受体分析。但进行免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot之前，需要1:1加入自备的2x样品缓冲液(含去垢剂如NP-40、Triton X-100、SDS)。用户可不用Kit中的Suspension Buffer，而直接用自行配制的样品缓冲液重悬胞核或胞浆沉淀。
2. 如果为凝胶阻滞实验(EMSA)目的提取核蛋白，建议用xP1200: 核-胞浆蛋白制备试剂盒 (Nuclear-Cytosol Extraction Kit)，该试剂盒并非提取完整的细胞核，而是直接提取可溶性核蛋白，可用于EMSA或Western Blot分析。 |
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发表于 2015-9-17 23:18
